L'étalonnage externe est une technique couramment utilisée en chimie analytique, notamment en chromatographie, pour quantifier la concentration d'un analyte dans un échantillon.
Cette méthode consiste à préparer une série de solutions étalons, de concentrations connues de l'analyte, qui sont ensuite analysées pour établir une droite d'étalonnage.
On trace ensuite les aires des pics chromatographiques en fonction des concentrations.
La droite résultante permet de déterminer la relation entre l'aire du pic et la concentration de l'analyte.
Lors de l'analyse d'échantillons inconnus, la surface du pic obtenue est reporté sur la droite d'étalonnage pour déduire la concentration de l'analyte.
Cette méthode peut être transposée en UV en prenant l'absorbance à une longueur d'onde donnée à la place de l'aire.
On injecte successivement un même volume d'une solution étalon
(concentration en élément à doser connue Cref)
et la solution à doser (concentration inconnue Ci). On compare
ensuite les chromatogrammes pour en déduire la concentration.
On a mref= K. Aref et mi = KAi mref/mi = Aref/Ai
En remplaçant la masse par la concentration massique : CrefVref/CiVi = Aref/Ai
Les volumes étant égaux,on obtient:
Toutefois, cette manière de procéder n'apporte aucune information sur la précision de la mesure. Afin de palier à ce problème, on réalise un droite d'étalonnage en injectant plusieurs solutions étalons à des concentrations différentes. Le calcul du R² (coefficient de corrélation) permet de s'assurer d'une part qu'il n'y a pas eu d'erreur sur la préparation des solutions étalons et d'autre part de la linéarité du détecteur. Autre avantage, on s'assure également que les erreurs dues au volume d'injection restent acceptables.
Ce type de dosage est très courant en HPLC tout comme dans les autres techniques d'analyse chimique.
Voici un exemple de dosage en CPG utilisant ce type d'étalonnage.